全球剩兩頭雌性的北方白犀�；虻镁�!科學家造出南北雜交胚胎

世界上最后一頭雄性北方白犀牛“蘇丹”在今年3月離世，該古老物種進入滅絕倒計時�？夏醽喿匀槐Ｗo區(qū)內(nèi)僅剩的兩頭雌性北方白犀牛，加上此前冷凍保存的精子，能否在現(xiàn)代輔助生育技術(shù)下絕處逢生?北京時間7月5日凌晨1時在《自然-通訊》雜志上揭曉的一篇論文帶來了希望：

意大利Avantea生殖技術(shù)實驗室的Cesare Galli和德國萊布尼茲動物園與野生動物研究所的Thomas Hildebrandt用冷凍的北方白犀牛精子和近親南方白犀牛的卵細胞體外受精合成“南北雜交”胚胎。下一步，他們計劃從存活的兩頭雌性北方白犀牛身上獲取卵細胞，創(chuàng)造純種的北方白犀牛胚胎。

最后的“蘇丹”

北方白犀牛是白犀牛的兩個亞種之一。它們曾經(jīng)分布在烏干達西北部、乍得南部、蘇丹西南部、中非共和國東部及剛果民主共和國東北部，如今是世界上最瀕危的物種。

犀牛角價比可卡因，這給它們帶來了滅頂之災。雄犀牛“蘇丹”1973年出生在南蘇丹，1歲時在野外被捕獲，送到了捷克的動物園中。

護林員24小時持槍保衛(wèi)蘇丹，保護它不受偷獵者的傷害。2009年，捷克動物園將四頭北方白犀牛送到了肯尼亞的奧爾佩杰自然保護區(qū)，啟動“最后的生存機會”計劃，其中包括兩頭雄性犀牛蘇丹和蘇尼，兩頭雌性犀牛Najin和Fatu。人們希望，回到熟悉的非洲水土后，這一物種能夠繼續(xù)繁衍。

2014年，蘇尼自然死亡，只剩下蘇丹受到保護區(qū)內(nèi)的40名持槍守衛(wèi)和18名飼養(yǎng)員不分晝夜的輪流看護。為防偷獵，蘇丹的犀牛角已被提前割去。

只是，年邁的蘇丹幾乎無法產(chǎn)生有活力的精子，右后腿上的感染更限制了他的交配能力。僅存的兩頭雌性個體分別是他的女兒和外孫女，由于子宮疾病也難以懷孕。

雌性白犀牛Najin(左)和Fatu(右)是一對母女，也是世界僅存的2只雌性北方白犀牛。2018年3月，病情惡化的蘇丹被執(zhí)行安樂死，結(jié)束了多災多難的一生。

取出兩頭雌性北方白犀牛的卵細胞人工輔助授精，胚胎交給近親南方白犀牛代孕，成了理論上的唯一希望。

令人失望的輔助生育現(xiàn)狀

輔助生育技術(shù)曾一度被動物保護學界寄予厚望，但其發(fā)展現(xiàn)狀遠遠低于大家的預期。美國辛辛那提動物園的Terri Roth稱，最簡單的人工授精技術(shù)只真正幫到了大熊貓、黑腳貂和亞洲象這3個物種。

對一種動物適用的輔助生育技術(shù)，很難直接移植到另一個物種上。所以，相對成熟的人類和家畜輔助生育技術(shù)對瀕危動物來說并無參考意義。而由于簡而易見的材料稀缺問題，科學家們研究瀕危動物受到極大限制。

絕大部分相關(guān)嘗試以流產(chǎn)或夭折告終。就犀牛而言，此前僅有一例成功取卵并合成胚胎的案例，但胚胎沒能順利發(fā)展到可以移植的階段。要知道，白犀牛體型龐大，性格倔強，母犀牛的卵巢在皮膚下1.5米，取卵的難度可想而知。

4枚南北雜交胚胎

由于白犀牛和馬有著共同的祖先，此次，研究團隊借鑒了馬類的輔助生育操作。

首先，科學家用長達2米的超聲裝置經(jīng)直腸從雌性白犀牛體內(nèi)取出卵母細胞，進行體外培養(yǎng)。他們通過314次卵泡穿刺獲得了83枚卵母細胞。此前，研究團隊曾在一頭自然死亡的雌性北方白犀牛體內(nèi)取出4枚卵母細胞，但這樣的材料過于珍貴，他們這次借用了歐洲動物園中南方白犀牛的卵母細胞。目前，在非洲南部大約生活著21000只南方白犀牛。

其次是輔助受精�，F(xiàn)存的北方白犀牛精子來自三頭雄性個體，質(zhì)量都很差，卵細胞質(zhì)內(nèi)單精子注射術(shù)成了唯一的選擇。注射后，科學家再用一種電刺激法提高受精的成功率。

最后，科學家將胚胎放置在37.5攝氏度的環(huán)境中培養(yǎng)，最終有4枚南北雜交胚胎發(fā)育到了胚泡階段，即可以移植到宮內(nèi)的程度，為國際上首次。他們從其中2枚胚胎中提取了胚胎干細胞系，驗證其分化能力。剩余2枚冷凍保存。

這提供了一種保存北方白犀牛基因的可行手段。下一步，研究團隊將嘗試為冷凍的胚胎尋找代孕南方白犀牛。與此同時，他們已經(jīng)做好奔赴肯尼亞的準備，從現(xiàn)存的兩頭雌性北方白犀牛體內(nèi)獲取卵母細胞，創(chuàng)造純種的北方白犀牛胚胎。

論文結(jié)尾提到了另一種正在嘗試的路徑：用ips(誘導多能干細胞)技術(shù)把庫存的北方白犀牛體細胞改編成人造卵母細胞。這同樣能幫助北方白犀牛保持可持續(xù)的基因多樣性。